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    制备和储存技术


       广东省脐血库是通过美国血库协会AABB认证的专业机构,实行24小时智能监控,确保脐血液处理过程符合国际标准。严格执行卫计委《脐带血造血干细胞库技术规范》建立完善的标准操作规程,采用国际先进的方法进行脐血造血干细胞的采集、制备、检测、冻存,确保储存样本质量。

收血室

收血室是脐血进入脐血库的第一站,检查所采集来的脐血是否符合入库标准。包括:脐血的外观和重量、母亲血样样本量是否
充足、脐血采集资料的完整性等。
利用条码仪对每一份脐血打印出一个唯一的脐血编号,此编号在脐血库中将是唯一的,用以确保每份脐血在脐血库中识别信息
的正确性和有效性。



计数室
计数室采用sysmex XE-5000全自动五分类血液分析仪对每一份采集的脐血进行全血有核细胞计数,对每份脐血的质量进行初步的筛选。对制备
后的脐带血造血干细胞进行冻前有核细胞计数,该计数是临床医生制定治疗方案的重要依据之一。
制备室
脐带血制备室的洁净间设计及管理均参照制药厂洁净车间的GMP国家标准。这里有十万级的更衣区和万级洁净实验区以及百
级的超净台,避免了脐带血造血干细胞在制备过程中污染的发生。脐带血造血干细胞制备过程包括去除脐带血的红细胞和血
浆,并在脐带血造血干细胞中加入冷冻保护剂。我库配备了瑞士全自动脐血分离机SEPAX设备,能保证脐带血在全封闭状态下完
成造血干细胞的分离制备,从而降低了造血干细胞的污染,提高了回收率,增加了造血干细胞的冻前活性。
冷冻组
1.程控降温室
经过制备处理的脐带血造血干细胞标本将会在程控降温室通过电脑程序控制进行逐步降温,最大程度保证造血干细
胞的活性。程控降温仪使降温程序自动进行,待标本降温到所需的温度后,取出放入液氮中永久保存。
2.液氮库
完成程控降温的脐带血标本将会转移到液氮库进行永久深低温保存,保持-196℃以下,使细胞停止一切的生命活动,经过水浴
快速复苏脐带血标本,细胞活性不受影响。液氮库占地约2500平方米,使用美国MVE液氮罐进行脐带血永久保
存,每个MVE液氮罐可以存放至少3600份标本,总库容量可高达150万份脐带血标本,液氮库内配备液位连续监测报警系统
及氧含量监测报警系统,可保证脐带血标本的质量及工作人员的安全。
流式细胞室
流式细胞检测是对造血干细胞表面进行荧光抗体标记,采用美国BD FACSCalibur流式细胞检测仪进行分析,用以确认造血干细胞在有核细胞中所占的比例。结合冻前有核细胞计数,就能反映脐带血中造血干细胞的数量。
干细胞培养室
造血干细胞培养室主要是利用CO2培养箱模拟人体内环境以对脐带血造血干细胞进行体外培养。培养结果主要反映了
脐带血干/祖细胞在体外的增殖和分化能力。
微生物室
1. 细菌霉菌检测室
采用法国梅里埃BacT/ALERT 3D全自动血培养系统,对脐带血进行细菌及霉菌检测。该血培养系统,与
手工方法相比,提高了陽性检出率,缩短了陽性检出时间。
2.酶免检测室
采用瑞士哈美顿全自动ELISA-STAR酶免检测系统,对乙肝表面抗原、梅毒螺旋体特异性抗体、艾滋病病毒
抗体、丙型肝炎病毒抗体、巨细胞病毒IgM抗体五项病原体进行检测。该系统在保证液体分配、孵育、洗板、读数
的精确控制的基础上,实现了高通量与自动化的需求。

3.核酸检测室
采用罗氏cobas s 201全自动核酸检测系统,开展HBV/HCV/HIV三项病毒核酸联合检测。该系统实现了样本汇集、核酸提取、实时荧光PCR全自动化及数据处理能力。最大程度地缩短了检测窗口期,确保了临床
应用的安全性。
遗传室 对脐带血进行遗传性血液病的筛查,筛查项目包括地中海贫血和G-6-PD缺乏症(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏
症,俗称蚕豆病)。利用血红蛋白电泳法及速率法分别对地中海贫血和G-6-PD缺乏症进行筛查,为脐带血的
安全使用提供有力保障。
HLA配型室
HLA配型室按照卫计委对医疗机构临床基因扩增检验实验室的要求进行设置。于2009年9月通过卫计委验收,并在2014年9月以优异的成绩通过了复审。HLA配型室分为四个区。每个区有不同的功能,并且四个
区必须是相互独立的。四个区分别是试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区。HLA配型室可以为本库内的所有
脐带血进行配型检测,免费向国内外提供公共库内的HLA配型资料,帮助患者寻找匹配的脐带血。
消毒供应室
消毒供应室分为去污区、物品包装及灭菌区、无菌物品存放区。配备仪器:全自动洗衣脱水机、自动干衣机、超声波清洗机、
脉动真空灭菌器。消毒室承担实验中心各科室所有重复使用医疗器械、器具和物品清洗消毒、灭菌以及无菌物品供应。